单克隆抗体人源化操作时需要注意哪些因素?

单克隆抗体人源化操作时需要注意哪些因素?

　单克隆抗体是抗体药物制备中最常用的方法之一，通过单克隆抗体药物来治疗各种疾病。但是，因为大部分单克隆抗体都需要通过其他动物来制备，所得抗体会因为异源性的原因造成抗体效果变差的情况。所以，抗体人源化操作就显得非常重要了。
　　什么是抗体人源化?
　　抗体人源化指的是将鼠源单克隆抗体以基因手段进行技术改造，将其中大部分的氨基酸序列进行取代，保留抗体亲和力和特异性的同时，降低其异源性的方式。
　　影响抗体人源化的因素有哪些?
　　1、抗原的选择
　　为了让抗体人源化更成功，第一步就是选择合适的抗原。纯度高、特异性强的抗原能够刺激出高特异性和高亲和力的抗体。在抗体制备中，我们需要评估分子的特性，确保足够的免疫原性;
　　2、免疫方案的选择
　　合理的免疫方案可以说是能够成功人源化抗体的第一步，这其中包括免疫动物的种类、免疫计划、免疫剂量等因素的确定。在保证激发免疫系统的同时，最大限度上减少对动物的影响;
　　3、细胞系的选择
　　对于不同的细胞系具备不同的表达能力和翻译后修饰的方式。所以，这个时候我们需要根据抗体的用途和性质来选择最合适的细胞系;
　　4、基因的优化
　　通多对单克隆抗体进行基因手段优化，让抗体人源化过得更加顺畅。这个过程包含了信号序列、重链调整以及轻链比例;
　　5、抗体活性和特异性的验证
　　在抗体人源化完成后，我们需要对所得抗体进行全面的活性和特异性验证。主要手段有：亲和力层析、免疫沉淀等手段;
　　影响到单克隆抗体人源化的因素有很多，需要结合抗原选择、免疫设计、细胞系设计、基因优化等过程，只有在这些方面都做好了，才能获得所需抗体。对于抗体人源化来说，需要在这些环节都要进行合理设计和优化，这样才能获得满足需求的单克隆抗体。